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系統識別號 U0002-3001201916194800
中文論文名稱 啤酒酵母菌粒線體形態與[NADH]/[NAD+]相關性之研究
英文論文名稱 Correlations of mitochondrial morphology and [NADH]/[NAD+] levels in Saccharomyces cerevisiae
校院名稱 淡江大學
系所名稱(中) 化學學系碩士班
系所名稱(英) Department of Chemistry
學年度 107
學期 1
出版年 108
研究生中文姓名 盧俊廷
研究生英文姓名 CHUNG-TING LU
學號 606180015
學位類別 碩士
語文別 中文
第二語文別 英文
口試日期 2019-01-28
論文頁數 27頁
口試委員 指導教授-陳銘凱
委員-官宜靜
委員-莊子超
中文關鍵字 啤酒酵母菌  粒線體形態  NADH  NAD  酒精去氫酶III 
英文關鍵字 Saccharomyces cerevisiae  mithchondrial morphology  NADH  NAD  Alcohol dehydrogenase III 
學科別分類 學科別自然科學化學
中文摘要 為探索使用ADH3p過度表現後酵母菌粒線體的型態與[NADH]/[NAD+]相關性,將已經構築好的目標酵母菌ADH3-pYES2 BJ2168(蛋白酶缺失)、ADH3-pYES2 BY4742、ADH3G211A-pYES2 BY4742(∆YLL001W)三種表現對象,進行誘導表現後蒐集量測誘導後的粒線體[NADH]/[NAD+]比值和計數每株菌的粒線體三種型態,透過統計分析尋找誘導後的粒線體[NADH]/[NAD+]比值和型態計數的相關性,結果顯示每株菌的粒線體型態的計數與[NADH]/[NAD+]比值的關聯性甚低。
本篇也提出了幾個更進一步的假設來針對實驗的事實進行探討。
英文摘要 To discover the correlation of mitochondrial morphology and the level of Nicotinamide adenine dinucleotide, which has been modified to over express ADH3 protein, in Saccharomyces cerevisiae.
We over express target yeast, ADH3-pYES2 BJ2168, ADH3-pYES2 BY4742, ADH3G211A-pYES2 BY4742(∆YLL001W) , and collect the level of Nicotinamide adenine dinucleotide to compare with mitochondrial morphology accounting. Through the Analysis of variance we can reveal the correlation between the level of Nicotinamide adenine dinucleotide and mitochondrial morphology accounting might not be exist.
Overall, we still have some hypothesis to discuss the conclusion.
論文目次 目錄
第一章 緒論 1
1.1 研究動機:……………………………………………………..2
第二章 材料與方法 3
2.1 實驗材料…………………………………….………………….3
2.2 實驗儀器……………………………………………………….. 3
2.3 方法…………………………………………………………….. 4
2.4 質體轉形:…………………………………………………….. 5
2.5 轉形質體蛋白質表現:………………………………………. 6
2.6 粒線體型態觀察:……………………………………………. 7
2.7 抽取粒線體:……………………………………………….. 8
2.8 分離粒線體基質:…………..………………………………..10
2.9 NADH / NAD+ 量測…………………..………………...……11
第三章 實驗結果 13
3.1 型態學:……………………………………………………. 13
3.2 NAD+、NADH濃度與型態關係之統計:…………………. 16
第四章 討論 19
第五章 附錄: 21
第六章 常用藥品 25
第七章 REFERENCE 27

圖表目錄
圖 a-ADH3-pYES2 BJ2168 14
圖 b-ADH3-pYES2 BY4742 14
圖 c-∆ADH3-pYES2 BY4742(∆YLL001W) 14
圖 d,圖 e分別為ADH3-pYES2 BJ2168、ADH3-pYES2 BY4742、∆ADH3-pYES2 BY4742表現形態 15
圖 f-為型態對細胞質之[NAD+] / Total [NAD/NADH]作分析 17
圖 g-為三種型態對粒線體內[NAD+] / Total [NAD/NADH]作分析 17
圖 h-為三種型態對細胞質之[NADH]/ [NAD+]作分析 18
圖 i-為三種型態對粒線體內[NADH] / [NAD+]作分析 18


表格 i- 統計母體表格 21
表格 ii- NADH標準曲線 22
表格 iii- SC-ura Plate 25
表格 iv- YPD Plate 25
表格 v- YPD medium 26
表格 vi- Phosphate-buffered saline(PBS) 26

方程式 1 - 細胞質[NADH]/[NAD+] 對型態之Kruskal-wallis rank sum test 22
方程式 2- 粒線體[NADH]/[NAD+] 對型態之Kruskal-wallis rank sum test 22
方程式 3- 粒線體[NADH]/[NAD+] 對型態之anova test 23
方程式 4- 細胞質[NADH]/[NAD+] 對型態之anova test 23
方程式 5- 細胞質 [NAD+] / total 對型態之Kruskal-wallis rank sum test 23
方程式 6- 粒線體 [NAD+] / total 對型態之Kruskal-wallis rank sum test 23
方程式 7- 粒線體 [NAD+] / total 對型態之Kruskal-wallis rank sum test 24
方程式 8- 細胞質 [NAD+] / total 對型態之anova test 24

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